1、過濾(lv)流動(dong)相，根據(ju)需(xu)要(yao)選(xuan)擇不(bu)同的濾(lv)膜。

2、對抽濾后的流動相進行超聲(sheng)脫氣10-20分鐘(zhong)。

3、打開液相色譜儀工作站（包括(kuo)計算機軟件和(he)色譜(pu)儀），連接好流動相管道，連接檢(jian)測系統。

4、進入HPLC控制界面主菜單(dan)，點擊(ji)manual，進入手動菜單(dan)。

5、有一段時(shi)間沒(mei)用，或者換了新的流(liu)動相，需(xu)要先(xian)沖洗泵和進樣閥(fa)。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽(chou)取(qu)。沖洗進樣閥(fa)，需(xu)要在manual菜單下，先(xian)點擊(ji)purge，再點擊(ji)start，沖洗時(shi)速度(du)不要超過(guo)10ml/min。

6、調節(jie)流(liu)量，初次使用(yong)新的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)，可以先試(shi)一下壓(ya)力，流(liu)速越大(da)，壓(ya)力越大(da)，一般不要超(chao)過(guo)2000。點擊injure，選用(yong)合適(shi)的(de)流(liu)速，點擊on，走基線(xian)(xian)，觀(guan)察(cha)基線(xian)(xian)的(de)情況。

7、設計走樣方法。點(dian)擊file，選(xuan)取(qu)selectusersandmethods，可以選(xuan)取(qu)現有的(de)各種走樣方法。若(ruo)需(xu)建立一個(ge)新(xin)的(de)方法，點(dian)擊newmethod。選(xuan)取(qu)需(xu)要的(de)配件，包括(kuo)進(jin)樣閥，泵，檢測器(qi)等，根據需(xu)要而不同。選(xuan)完后，點(dian)擊protocol。

8、進(jin)樣(yang)(yang)和進(jin)樣(yang)(yang)后(hou)操作。選定走(zou)樣(yang)(yang)方(fang)法(fa)(fa)，點擊start。進(jin)樣(yang)(yang)，所(suo)有的(de)樣(yang)(yang)品(pin)均需(xu)過濾。方(fang)法(fa)(fa)走(zou)完(wan)后(hou)，點擊postrun，可記錄數據和做標記等。全部(bu)樣(yang)(yang)品(pin)走(zou)完(wan)后(hou)，再用上面的(de)方(fang)法(fa)(fa)走(zou)一(yi)段基線，洗掉剩(sheng)余物。

9、關機時，先關計算機，再關液相色譜。


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