1、實驗儀器與試劑

   色氨(an)酸樣品，甲醇， 液相(xiang)色譜儀梯度系統，紫外檢(jian)測器，手動進樣閥(fa)，色譜工作站，0.03%KH2PO4溶液

2、HPLC色譜分析條(tiao)件

   流動相為0.03%KH2PO4溶液（A）-甲醇（B），線性梯度淋洗，流速1.0mL/min，柱溫 35℃，檢測波長276nm。
流動相 時間（t/min）
 5 10 15 20
A（%） 80 90 80 70
B（%） 20 10 20 30

3、標準溶液的配制

   精密稱取色氨(an)酸標準(zhun)標準(zhun)品50mg，置100ml容量瓶(ping)中，振搖，用流動相溶(rong)解到刻度，作(zuo)為供試(shi)品溶(rong)液，另取色氨(an)酸樣品適量，同法操(cao)作(zuo)。

4、標準直線的制作

   精密稱(cheng)取色氨(an)酸(suan)標準(zhun)樣品(pin)適(shi)量 ,分別(bie)稀釋制(zhi)成每1ml 中(zhong)含色氨(an)酸(suan)50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液(ye)，注入液(ye)相(xiang)色譜儀(yi)，以色氨(an)酸(suan)峰面(mian)積A為縱坐標，濃度C為橫(heng)坐標，制(zhi)作回(hui)歸標準(zhun)直線(xian)。

5、發酵液中樣品中色氨酸含量的測定
取發酵液，稀釋配制成約 500μg/ ml 的溶液，搖勻，過濾，取25μl進樣，在液相色譜儀下測量，記錄峰值面積，作圖。



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